大家都知道IPTG【CAS:367-93-1】在生物實驗室的用途非常廣泛，那么這個在生化研究領域，這個人人知曉的IPTG到底有哪些用途呢？下面小編為大家介紹下吧！
1.IPTG主要用作誘導劑，誘導蛋白表達，誘導乳糖操縱子表達。
2.IPTG通常和X-GAL【CAS：7240-90-6】一起搭配使用，用于藍白菌落的篩選。
3.IPTG也用在發(fā)酵提取，細胞培養(yǎng)中。
4.IPTG還可以用在疫苗研發(fā)、大腸桿菌表達目標蛋白、細胞重組表達等研究中。 IPTG誘導原理
首先
E. coli的乳糖操縱子（元）含Z、Y及A三個結構基因，分別編碼半乳糖苷酶、滲透酶和乙酰基轉移酶，此外還有一個操縱序列O、一個啟動序列P及一個調(diào)節(jié) 基因I。I基因編碼一種阻遏蛋白，后者與O序列結合，使操縱子（元）受阻遏而處于關閉狀態(tài)。在啟動序列P上游還有一個分解（代謝）物基因激 活蛋白（CAP）結合位點。由P序列、O序列和CAP結合位點共同構成lac操縱子的調(diào)控區(qū)，三個酶的編碼基因即由同一調(diào)控區(qū)調(diào)節(jié)，實現(xiàn)基因產(chǎn)物的協(xié)調(diào)表達 。
其次
在沒有乳糖存在時，lac操縱子（元）處于阻遏狀態(tài)。此時，I序列在PI啟動序列操縱下表達的Lac阻遏蛋白與O序列結合，阻礙RNA聚合酶與P序列結合，抑制轉錄啟動。當有乳糖存在時，lac操縱子（元）即可被誘導。在這個操縱子（元）體系中，真正的誘導劑并非乳糖本身。乳糖進入細胞，經(jīng)β-半乳糖苷酶催化，轉變?yōu)楫惾樘恰：笳咦鳛橐环N誘導劑分子結合阻遏蛋白，使蛋白構象變化，導致阻遏蛋白與O序列解離、發(fā)生轉錄。異丙基硫代半乳糖苷（IPTG）的作用與異乳糖相同，是一 種作用極強的誘導劑，不被細菌代謝而十分穩(wěn)定，因此被實驗室廣泛應用。 使用方法
首先把IPTG配制成23.83 mg/ml（100 mM）的水溶液，并進行過濾除菌后保存。然后在100 ml的瓊脂培養(yǎng)基中，加入100 μl的上述溶液、200 μl的X-Gal（20 mg/ml的二甲基甲酰胺（DMF）溶液）和100 μl的Amp（100 mg/ml），制作成IPTG、X-Gal、Amp平板培養(yǎng)基。當DNA片段插入至pUC系列載體（或其他帶有l(wèi)acZ、Amp基因載體），然后轉化至lacZ缺失細胞中后，涂布上述的IPTG、X–Gal、Amp平板培養(yǎng)基，可根據(jù)長出菌體的藍白色，而方便地挑選出基因重組體（白色為具有DNA插入片段的基因重組體）。
 
作用
誘導外源基因的表達，普遍應用于原核表達系統(tǒng)，使其表達量增高，產(chǎn)物穩(wěn)定，具有易鑒定，易純化的優(yōu)點。
 
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